Serologiniai testai: tipai, naudojimas

Laboratorinės diagnostikos beveik visų infekcinių ligų remiasi kraujo aptikimo iš paciento antikūnų, kurie yra pagaminti iš patogeno antigeno, serologinių metodų. Jie nuvyko į medicinos praktika XIX - XX amžiaus pradžioje.

Mokslo plėtra padėjo apibrėžti antigeno struktūrą mikrobų ir cheminių formulių jų toksinų. Tai įmanoma sukurti ne tik gydomąjį, bet ir diagnostikos serumo. Jie gaunami susilpnintos patogenų laboratorinius gyvūnus administravimą. Po kelių dienų mirkymo kraujo triušių arba peles paruoštus produktus, naudojamus bakterijų arba jų toksinų, naudojant serologinius tyrimus, nustatymą.

Išorinis pasireiškimas šios reakcijos priklauso nuo jo formuluotės sąlygų ir antigenų paciento kraujo būklę. Jei mikrobai yra netirpios dalelės, jie išspręsti, lizuojamos, mažinama arba surišta serume. Jei antigenai yra tirpus, atrodo kaip neutralizuojamas arba kritulių reiškinys.

agliutinacija (MA) suvestinė

Serologinis agliutinacijos testas yra labai specifinė. Tai lengva atlikti ir yra gana aišku, kad greitai aptikti antigenų buvimą pacientų serume. Jis naudojamas nustatant Vidal reakciją (diagnozė vidurių šiltinės ir paratifas) ir WEIGL (šiltinės).

Ji yra grindžiamas konkrečiu sąveikos tarp žmogaus antikūnų (arba) agliutininų ir mikrobų ląstelių (agglyutenogenami). Po jų sąveiką yra suformuota daleles, kurios iškrenta į nuosėdas. Tai yra teigiamas ženklas. Nustatymo reakcija gali būti naudojamas gyvas ar negyvas mikrobų agentai, grybelius, pirmuonis, kraujo ląstelių ir somatinių ląstelių.

Cheminė reakcija yra padalintas į du etapus:

1. Specifiniai antikūnai junginys (AT) su antigenų (Ag).
2. Nespecifinis - iš konglomeratų nusodinimo AG-AT, ty Zlepiać išsidėstymą.

Reakcijos netiesioginis agliutinacijos (TPHA)

Ši reakcija yra jautresnis nei ankstesnės. Jis naudojamas dėl ligų, kurias sukelia bakterijos, viduląstelinių parazitų, pirmuonių diagnozę. Jis yra toks specifinis, kad gali aptikti net labai nedidelės koncentracijos antikūnų.

Dėl jo formuluotės, naudojant išgrynintus avies raudonųjų kraujo kūnelių ir raudonųjų kraujo ląstelių žmogaus gydytiems su antikūnais ar antigenų (tai priklauso nuo to, ką Lab nori rasti). Kai kuriais atvejais, žmogaus eritrocitai gydomi imunoglobulinai. Serologiniai atsakas eritrocitų laikomas galiojančiu, jeigu jos kritulių įvyko vamzdžio apačioje. Teigiamas reakcija mes galime pasakyti, kai ląstelės yra suskirstyti į apversto skėčio formos, užimanti visą dugną. Neigiama reakcija įmetė, kai raudonųjų kraujo kūnelių atsiskaityti iš stulpelio ar mygtukus iš apačios centre forma.

kritulių reakcija (RP)

Serologiniai reakcijos Šio tipo padėti nustatyti labai mažų dalelių antigenus. Tai gali būti, pavyzdžiui, baltymai (arba jų dalis), mišiniai baltymų su lipidų ar angliavandenių, bakterijų dalis taip pat ir jų toksinų.

Serumai reakcijos yra gaunamas dirbtinio užkrėtimo gyvūnų, paprastai triušių. Taikant šį metodą, jūs galite gauti absoliučiai jokios nusodinimo serumo. Sustojimo serologinius kritulių veikimo mechanizmas toks pat apie agliutinacijos metodu. Šykščias serumo jungiasi prie antigenų nustatymo antikūnai koloidinio tirpalo , kad sudarytų didelių baltymų molekulių, kurios yra nusodinami ant vamzdžio dugno arba ant substrato (gelio). Šis metodas yra laikomas labai konkretus ir gali aptikti net pėdsakų medžiagos.

Naudojami diagnozuoti maras, tuliaremijos, juodligės, meningito ir kitų ligų. Taip pat dalyvauja teismo ekspertizės.

Gelis nusėdimo testas

Serologinių testai gali būti atliekami ne tik skystoje terpėje, tačiau agarozės gelyje. Tai vadinama difuzinis kritulių metodas. Su juo studijuoti sudėtingų antigeno mišinių sudėtį. Šis metodas yra pagrįstas antigenų chemotaksio su antikūnais, ir atvirkščiai. Gelio jie juda vienas link kito skirtingu greičiu ir susirinkimo, kad sudarytų kritulių linijas. Kiekviena eilutė - vienas rinkinys K-AT.

Neutralizacijos egzotoksinas Antytoksyna (RN)

Antitoksininiai serumo gali neutralizuoti eksotoksino kuri mikroorganizmai gaminti. Remiantis šiais duomenimis ir serologinius testus. Mikrobiologijos naudoja šį metodą serumo, toksinų ir toksoidai titruojant, o taip pat jų terapinis poveikis. Iš toksino neutralizavimo jėga yra nustatomas pagal tradicinių vienetų - AE.

Be to, dėl šios reakcijos gali nustatyti rūšims ar priklausančius eksotoksino. Jis naudojamas stabligės, difterijos, botulizmo diagnozei. Tyrimas gali būti atliekamas "ant stiklo", ir gelyje.

lizės reakcija (RL)

Imuninė serumo, kuris patenka į kūną paciento, turi, vienas nuo kito iš savo pagrindinės funkcijos iš pasyvaus imuniteto, net ir lizės savybės. Ji yra pajėgi ištirpinant mikrobinių agentus, korinio ir užsienio elementai viruso patekti į paciento kūną. Priklausomai nuo antikūnų, įtrauktų į serumo izoliuotas bactericidin, citolizinais, spirohetoliziny, hemolizinais ir kitų specifiškumo.

Šie specifiniai antikūnai vadinami "papildymas". Jis randamas beveik visose kūno skysčiais, jis turi sudėtingą baltymų struktūrą ir yra labai jautrus temperatūros padidėjimas, sukrėtė, rūgščių ir tiesioginių saulės spindulių. Tačiau sausos būklės gali išlaikyti savo lizės savybių iki šešių mėnesių.

Yra keletas serologinių tyrimų šio tipo rūšių:

- Bakterioliza;

- hemolizės.

Bakterioliza atliekamas naudojant paciento kraujo serume ir specifinį imuninį serumą su gyvais mikrobų. Jei, tada tyrėjas mato bakterijų lizės ir atsakymas bus laikomas pakankamas kiekis teigiamą papildo randama kraujyje.

Antra kraujo serologinės reakcijos yra tai, kad eritrocitus pakaba gydytam pacientui serume, kurių sudėtyje yra hemolizinais, suaktyvinamas tik tam tikro komplimentą buvimą. Jei yra vienas, tada Lab žiūri raudonųjų kraujo ląstelių ištirptų. Ši reakcija yra plačiai naudojami šiuolaikinėje medicinoje, siekiant nustatyti papildo titrą (ty, jos mažiausias dydis provokuoja lizę raudonųjų kraujo ląstelių) kraujo serume ir dėl komplemento surišimo tyrimo gamybai. Būtent tokiu būdu atlikto teigiama serologinė reakcija sifiliui - Wasserman.

komplemento sujungimo (RSK)

Ši reakcija yra naudojamas siekiant aptikti antikūnus serume, kad būtų infekcinio agento pacientui, taip pat nustatyti jo antigeninio struktūros iniciatorius.

Iki šio taško mes aprašė paprastus serologinius tyrimus. RPT laikomos sunkiomis reakciją, nes ji bendrauja ne du, bet tris elementus: antikūną, antigeno ir papildyti. Jo esmė yra ta, kad tarp antikūno ir antigeno sąveika vyksta tik baltymų komplimentas kurie adsorbuoja iš suformuoto komplekso K-paviršiuje buvimas.

Patys antigenų po to komplemento, atsižvelgiant į esminius pokyčius, kurie rodo, reakcijos kokybę. Tai gali būti lizės, hemolizės, imobilizacijos, baktericidiniai arba bakteriostatinis poveikis.

Pati reakcija vyksta dviem etapais:

1. Iš antikūnų antigenų, kuri nėra vizualiai pastebimas tyrėjas formavimas.
2. antigenas pagal komplemento veiksmų keitimas. Ši fazė paprastai galima atsekti plika akimi. Jei vaizdo atsakas nėra matomas, tada naudokite papildomą rodiklių sistemą, kuri leidžia aptikti pakeitimus.

rodiklis sistema

Ši reakcija yra grindžiamas privalomas papildo. Testus vamzdžiai valandą po nustatymo RSK pridėtinės išgrynintų avino eritrocitai ir serumo hemolizinio, kuriame yra ne komplementą. Jei vamzdis buvo paliktas nesurištas komplementą, ji bus prisijungti prie sudėtingą N-AT suformuotą tarp avių kraujo ląstelių ir hemolizino, ir sukelti jų ištirptų. Tai reikštų, kad DGC yra neigiamas. Jei eritrocitai išliko, tada, atitinkamai, reakcija yra teigiama.

hemagliutinuojančių (RHA)

Yra dviejų iš esmės skirtingų hemagliutinacijos. Vienas iš jų - serologinis, jis naudojamas nustatant kraujo grupių. Šiuo atveju eritrocitų bendrauti su antikūnais.

Ir antra reakcija nėra susijusi su serologinių, nes raudonųjų kraujo kūnelių reaguoti su hemagliutinino pagamintos virusų. Kadangi kiekvienas Exciter veikia tik dėl konkrečių eritrocitų (vištienos, avienos, beždžionėms), galime manyti, ši reakcija siaurai konkretus.

Aiškiai teigiamas arba neigiama reakcija, ji yra įmanoma, kad kraujo ląstelių vietoje vamzdžio apačioje. Jei jie išsiaiškinti primena apverstą skėtį, tada norimą virusas būna paciento kraujyje. Ir jei visi eritrocitai susiformavo kaip monetoje kolonų, nėra Nežinoma patogenai.

Reakcija hemagliutinacija slopinimo (HAI)

Tai labai specifinė reakcija, kuri leidžia nustatyti, formos, tipo viruso arba specifinių antikūnų buvimas paciento yra kraujo serume.

Jo esmė yra tai, kad antikūnai pridėta į mėgintuvėlį, kuriame yra bandymo medžiagos, neleidžia nusėdimas antigenų eritrocitų, tokiu būdu sustojimo hemagliutinacija. Tai kokybinis rodiklis, kad specifinių antigenų kraujyje buvimo prie tam tikros norimą viruso.

Reakcijos imunofluorescencinis (RIF)

Reakcija yra pagrįstas gebėjimu nustatyti kompleksus su AT-AH fluorescencinė mikroskopijos po gydymo flyuorohromnymi dažiklių. Šis metodas yra paprastas naudoti, nereikalauja izoliaciją gryno kultūros ir užima mažai laiko. Ji yra būtina, kad skubaus diagnozavimo infekcinių ligų.

Praktikoje, šios serologiniai testai skirstomi į dvi kategorijas: tiesioginių ir netiesioginių.

Tiesioginio rifas gaminamas antigeną, kurį prieš tai perdirbtos fluorescencinės serumo. Ir netiesioginių yra tai, kad vaistas yra pirmiausia yra apdorojamos su paprastųjų Diagnostiką apimantis antikūnus, į norimą antigenu ir tada iš naujo-taikomas fluorescencinės išrūgų,, kuris yra specifinis, kad iš sudėtinio K-AT baltymų, ir mikrobų ląstelės tampa matoma mikroskopu.