Polimerazės grandininė reakcija ir jos pobūdis ir apimtis

Polimerazės grandininė reakcija (PGR) - iš molekulinės biologijos, kuri leidžia aptikti biologinių medžiagų mažais metodas deoksiribonukleorūgšties (DNR), arba, tiksliau, kai kurie iš jos fragmentų, ir daugintis juos daug kartų. Tada jie buvo nustatyti vizualiai gelyje. Reakcija buvo sukurtas 1983 metais K. Mullis ir įtraukti į neįvykdytų atradimų pastaraisiais metais sąrašą.

Kas yra mechanizmus, PGR

Visa procedūra yra grindžiama nukleino rūgščių gebėjimas savarankiškai replikuotis, kad šiuo atveju vyko dirbtinai laboratorijoje. DNR replikacijos negali prasidėti bet molekulės regioną, bet tik tose srityse, su tam tikra seka nukleotidų - pradinių fragmentų. Siekiant, kad polimerazės grandininė reakcija prasidėjo, turime pradmenimis (arba DNR zondai). Tai yra trumpi fragmentai DNR sekų su tam tikra nukleotidų sekos. Jie papildo (t.y., atitinkantis) mėginių DNR porcijomis pradžia.

Žinoma, sukurti pradmenis, mokslininkai turi ištirti nukleotidų seką, nukleino rūgšties, kuris dalyvauja procedūros. Šie DNR zondai užtikrinti, kad reakcija ir jo inicijavimo specifiškumą. Polimerazės grandininė reakcija nebus eiti, jei Pavyzdžio nėra rasti bent vieną molekulę norimą DNR. Apskritai, reakcijos reikia pirmiau pradmenis, nukleotidų rinkinį, karščiui atsparios DNR polimerazę. Pastaroji yra fermentas - katalizinius reakcijos sintezės naujų nukleino rūgšties molekulės atrankos pagrindu. Visi iš šių medžiagų, įskaitant biologinės medžiagos, kuri yra būtina siekiant nustatyti DNR yra sujungti į reakcijos mišinį (tirpalo). Jis dedamas į specialų termostatas, kuris atlieka savo labai greitą šildymo ir vėsinimo per nustatytą laiką - ciklas. Jie paprastai yra 30-50.

Kaip tai reakcijos

Iš tai esmė ta, kad vieno ciklo metu, praimeriais yra prijungti į porcijas norimo DNR, po to, kai, kuris po to padvigubėjimo, fermento. Dėl susidariusių DNR grandinę, susintetintų vėlesnių ciklų daugiau ir daugiau dalių vienodų molekulių pagrindu.

Polimerazės grandininė reakcija yra nuosekliai grąžintos po savo veiksmus. Ji pasižymi pirmasis dvigubai produkto kiekį kiekvieno šildymo ir aušinimo ciklo metu. Antrajame etape reakcijos įvyksta lėtėjimą, nes fermentas yra sugadinta ir praranda aktyvumą. Be to, išeikvoti atsargas nukleotidų ir pradmenų. Per pastarąjį etapas - plato - produktai nebėra kaupti, reagentai daugiau.

Kur jis yra naudojamas

Be abejo, platesnės taikymo polimerazės grandininė reakcija nustato, medicinoje ir mokslo. Jis naudojamas viešojo ir privataus biologija, veterinarijos, farmacijos, ir net ekologijos. Nors pastarasis daro stebėti maisto kokybės ir aplinkos objektus. Aktyviai naudojami polimerazės grandininę reakciją į teismo praktikos patvirtinti tėvystę ir nustatyti asmens tapatybę. Be teismo ekspertizės, taip pat paleontologija, dažnai šis metodas yra vienintelis būdas, nes jis paprastai yra prieinami labai mažais DNR tyrimą. Žinoma, labai plačiai naudojamas metodas yra rasti medicinos praktikoje. Jam reikėjo ją tokiose srityse, kaip genetika, infekcinių ir onkologinių ligų.